免疫檢測相關(guān)方法介紹

免疫力低下人群易患腫瘤：腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)率和存活期等都與機體的免疫狀態(tài)有密切關(guān)系。

人類的免疫系統(tǒng)由免疫器官、免疫細胞、免疫分子和淋巴循環(huán)網(wǎng)組成。免疫細胞通過血液循環(huán)前往全身各器官和組織。

通過對人體外周血中的T淋巴細胞亞群比例變化的定量分析、T細胞抗原受體（T CELL RECEPTOR, TCR）多樣性變化的定性與定量分析判斷人類個體的細胞免疫應(yīng)答能力（包括抗腫瘤能力和抗感染能力），以指導(dǎo)臨床抗腫瘤治療方案的確定。

檢測方法：

（一）免疫酶染色試驗 （immunoenzyme staining test，IEST） 免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養(yǎng)物涂片為固相抗原，當其與待測標本中的特異性抗體結(jié)合后，可再與酶標記的第二抗體反應(yīng)形成酶標記免疫復(fù)合物，后者可與酶的相應(yīng)底物作用而出現(xiàn)肉眼或光鏡下可見的呈色反應(yīng)。

（二）皮內(nèi)試驗 （intrader rpmal test,ID） 宿主在病原體刺激后，體內(nèi)產(chǎn)生親細胞性抗體（IgE和IgG4）。

當其與相應(yīng)抗原結(jié)合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質(zhì)，引起注射抗原的局部皮膚出現(xiàn)皮丘及紅暈，以此便可判斷體內(nèi)是否某有種特異性抗體存在。

（三）免疫擴散（immunodiffusion）和免疫電泳（immunoelectrophoresis）

1．免疫擴散 于一定條件下，抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇，在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉淀。本法有兩種類型：①單相免疫擴散：將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中，使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環(huán)，其大小與抗原量成正比；②雙相免疫擴散：將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置，二者可自由擴散并在中間形成沉淀線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體，也可用已知抗體檢測未知抗原。

2．免疫電泳 是將免疫擴散與蛋白質(zhì)凝膠電泳相結(jié)合的一項技術(shù)。計量校準事先將抗原在凝膠板中電泳，之后在凝膠槽中加入相應(yīng)抗體，抗原和抗體雙相擴散后，在比例合適的位置，產(chǎn)生肉眼可見的弧形沉淀線。

（四）酶聯(lián)免疫吸附試驗 （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）

vvv 酶聯(lián)免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物（酶）結(jié)合，使其保持免疫反應(yīng)和酶的活性。把標記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結(jié)合，再使之與相應(yīng)的無色底物作用而顯示顏色，根據(jù)顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定結(jié)果。

（五）對流免疫電流試驗 （counter-immunoelectrophoresis，CIE） 對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質(zhì)的一種快速，敏感的電泳技術(shù)。既可用已知抗原檢測抗體，又可用已知抗體檢測抗原。

反應(yīng)結(jié)果可信度高，適用范圍廣。

以本法為基礎(chǔ)改進的技術(shù)有酶標記抗原對流免疫電泳（enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE ）和放射對流免疫電泳自顯影（radio-immuno-counterelectrophoretic autography，RCIEPA）等技術(shù)。

二者克服了電泳技術(shù)本身不夠靈敏的弱點。